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TECHNICAL ARTICLESQM100組織研磨儀研磨玉米葉方法
目的:
批量研磨玉米葉片,為后續(xù)提取核酸,進(jìn)行遺傳或生理生化指標(biāo)分析研究提供方便。為種子和農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量管理部門、種子公司等單位利用分子方法檢測樣品純度、檢測純度真實(shí)性等實(shí)驗(yàn)所必需的樣品前處理工作提供參考。
地點(diǎn):某種業(yè)育種和栽培實(shí)驗(yàn)室
材料:新鮮玉米幼苗葉片
儀器:主機(jī),QM100組織研磨儀;配件:2ml研磨適配器,直徑3或5mm研磨鋼珠
步驟:
1)取樣:取新鮮玉米幼苗葉片,剪成直徑6~8mm大小碎片;
2)將3-5片葉片碎片置于2ml離心管(EP管)中,同時(shí)加入1顆5mm和2顆3mm不銹鋼研磨鋼珠。
3)將加入葉片和研磨鋼珠的EP管關(guān)蓋密封,放入QM100組織研磨儀研磨玉米葉方法的2ml研磨適配器中,然后和適配器一起整體進(jìn)入液氮冷凍2-3分鐘或至液氮不“沸騰”為止。
4)迅速從液氮中取出適配器,并迅速將其固定在研磨儀的搖臂中;
5)設(shè)置QM100組織研磨儀研磨玉米葉方法的研磨時(shí)間為2分鐘,研磨頻率1500rpm(1500次/分鐘)。
結(jié)果:
可以得到非常細(xì)碎的葉片粉末,提取核酸效果很好。
結(jié)論:
用行玉米葉片的冷凍研磨,可以直接將研磨管和適配器浸泡在液氮里,只需一次性1-2分鐘的液氮冷凍和一次約2分鐘的研磨,就能批量粉碎多達(dá)54個(gè)2.0ml的樣品(用96孔深孔板的話則是192個(gè)樣品)。處理時(shí)間迅速,有效防止了溫升,為后續(xù)有效提前核酸提供了保障。此外,還大大節(jié)省液氮,操作也更加。
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